据国际细胞外囊泡学会(ISEV)在2014年的提议,外泌体鉴定3个标志:透射电镜(transmission electron microscope,TEM)、粒径(Nanoparticle Tracking Analysis, NTA)、蛋白标志物(Western Blot, WB)。
外泌体透射电镜TEM鉴定外泌体大小、形态,判断样本是否含有外泌体。
外泌体透射电镜分辨率为0.1~0.2nm,适合外泌体双层囊膜超微结构观察,可观测样本中是否存在外泌体样结构(通常为茶托型或一侧凹陷的半球形),同时可测量外泌体大小。
检测平台:TecnaiTM G2 Spirit BioTWIN
检测结果:三张透射电镜图片,尽可能体现完整的外泌体形态(如有)
检测周期:10-15个工作日
外泌体介导细胞间的信号交流,是目前外泌体研究中十分热门的领域。外泌体中有丰富RNA以及蛋白,其中RNA的种类包括miRNA,LncRNA,mRNA等[1]。大量文献报道,胞外囊泡粒径及浓度服务,这些RNA在细胞间的相互交流中发挥着巨大的作用。如,外泌体中miRNA可以调节下游细胞对胰岛素的敏感性。在研究中,作者培养脂肪组织巨噬细胞(ATM),并收集培养基中富含miR-155的外泌体,作用于下游的脂肪细胞和肌细胞。miR-155可以结合Argonaut蛋白,并募集下游的目标mRNA,从而影响细胞对胰岛素的敏感性和对葡萄糖的耐受性[2]。此外,外泌体中的LncRNA可以调控下游细胞的转录水平[3],mRNA、蛋白等可以通过外泌体转运至下游细胞,并在胞内进行翻译
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