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植物原位杂交技术服务 武汉科锐诺生物

发布日期 :2023-07-26 17:37发布IP:123.58.44.124编号:11820535
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染色体发现距今已有150多年的历史,染色体检测被广泛用于动、植物及人类的细胞遗传学研究,随着染色体分技术和分子生物学技术的发展。染色体研究范围也不断扩大,特别是用于肿1瘤分子诊断。肿1瘤细胞的染色体变化是一非常普遍的现象,可分为原发和继发两类。在肿1瘤形成的生物学基础方面,原发性的染色体变化与引起肿1瘤的直接原因有关,肿1瘤细胞中可以发现各种形式的染色体畸变,如缺失、重复、易位、重排、单体断裂及核内复1制等;继发性变化主要是肿1瘤细胞核型的改变。染色体的检测对于肿1瘤的诊断、鉴别诊断、生物学行为判别等方面都重要意义。染色体的检测方法进展很快,检测的精1确率也不断提高,


荧光原位杂交技(fish)原理:是利用荧光标记的特异核酸探针与细胞内相应的靶DNA分子或RNA分子杂交,通过在荧光显微镜或共聚焦激光扫描仪下观察荧光信号,来确定与特异探针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布,或者是结合了荧光探针的DNA区域或RNA分子在染色体或其他细胞器中的定位。

荧光原位杂交技(fish)实验步骤:

1、组织固定:组织取出洗净后立即放入固定液(DEPC水配制)中固定2-12h。

2、脱水:组织固定完成后经梯度酒精脱水后浸蜡,包埋。

3、切片:石蜡经切片机切片,摊片机捞片,62°烤箱烤片2h。

4、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲1苯Ⅰ 15min-二甲1苯Ⅱ 15min-无水乙醇Ⅰ 5min-无水乙醇Ⅱ 5min,风干,植物原位杂交技术服务,DEPC水浸泡。

5、消化:根据组织固定时间长短,切片于修复液中煮沸10分钟,自然冷却。后基因笔画圈,根据不同组织不同指标特性,滴加蛋白酶K(20ug/ml) 37°消化20min。纯水冲洗后PBS洗3次×5min。





分子病理学是20世纪70年代初,随着疾病的细胞生物学和分子生物学的发展和相互渗透的一个病理学分支学科。分子病理学是应用分子生物学理论、技术和方法,研究疾病发生1发展过程中蛋白质和核酸水平变化对疾病发生过程的影响及其作用,探讨疾病发生的分子机制,揭示疾病本质的现代病理学的分支学科。深入进行疾病分子病理学研究,将为疾病的精1准诊断和精1准治1疗提供重要的科学依据。


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